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恒遠生物為您揭秘——鱟實驗法


鱟試劑簡介:
鱟的身上流淌著一種十分珍奇的血液。這種血液是淡藍色的。這種淡藍色的血液中含銅量很高,而且一遇到細菌就會凝固。利用鱟血液的這種特殊反應(yīng),對它進行處理,可以制成一種特殊的檢驗試劑——“鱟試劑”。鱟試劑可以準確、快速地檢測人體內(nèi)部組織是否因細菌感染而致病;在制藥和食品工業(yè)中,也可用它對毒素污染進行監(jiān)測。

實驗原理:鱟是一種海洋節(jié)肢動物,血液中含有一種變形細胞,此細胞的裂解物可與微量細菌內(nèi)毒素起凝膠反應(yīng),即細胞裂解物中的一種酶被內(nèi)毒素激活,使細胞裂解物中蛋白質(zhì)形成凝膠。鱟試驗具有快速、簡便、靈敏等優(yōu)點。

材料與儀器:鱟試劑、生理鹽水、無菌水、內(nèi)毒素、安瓶等。

操作步驟:

一、材料
1.  鱟試劑(即裝于安瓶內(nèi)的鱟變形細胞裂解物的凍干制品)。
2.  待測物(血液、細菌培養(yǎng)上清液或注射劑等)。
3.標準內(nèi)毒素(大腸桿菌內(nèi)毒素含量100 ng/ml)、無熱原生理鹽水、無菌蒸餾水。
4.1 ml無菌吸管、37℃水浴箱等。
 
二、方法
1.  打開3支鱟試劑安瓶,各加0.1 ml無菌蒸餾水使之溶解,同時編號①、②、③。
2.  向①、②、③安瓶中分別加待測物、標準內(nèi)毒素、無熱原生理鹽水各0.1 ml。
3.  輕輕搖勻后,垂直放37℃水浴,15~30 min后取出觀察有無凝固。
 
三、結(jié)果觀察
十十 形成牢固凝膠,倒持安瓶凝膠不動。
十 形成凝膠,但不牢固,倒持安瓶凝膠能動。
- 不形成凝膠。
凡結(jié)果陽性者表示內(nèi)毒素陽性,本實驗②為陽性對照,③為陰性對照。

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