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恒遠生物|人羊膜細胞(WISH)培養建議
品牌: 恒遠生物
貨號: HYCC10347
中文名稱: 人羊膜細胞；WISH
規格: T25
形態特性: 上皮細胞樣
生長特性: 貼壁生長
特征特性: 最初以為這株細胞的起源是正常羊膜，但隨后通過同工酶分析、HeLa標記染色體和DNA指紋法分析，證實該細胞是HeLa細胞污染的；角蛋白陽性。
培養條件: DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS
傳代方法: 1：2~1:4傳代，每周2~3次。
凍存條件: 無血清細胞凍存液
一、細胞收到后處理
細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完全培養液并封好瓶口是細胞運輸的常見辦法。收到細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作，培養箱靜置2-4小時。鏡下觀察：未超過80%匯合度時，可將瓶裝的完全培養液收集至離心管中，加入6ml完全培養基，放入37℃、孵箱培養；超過80%匯合度時，根據情況傳代或者凍存，具體操作見細胞培養步驟。（注意發貨的是密封培養瓶的話，處理完后放入培養箱培養記得培養瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的完全培養基，另外一瓶用自己配的完全培養基），若是5%CO2的培養箱，可用密封培養瓶，擰緊瓶蓋后放入5%CO2培養箱，48H內要換液一次。
二、細胞培養常見問題解答
1.培養基為什么一般都是偏紅色?
因為培養基加了酚紅來顯示顏色，指示pH范圍為6-8，顏色會由黃變為紫紅。這是為了我們能更直觀觀察培養液的變化，如變黃，則代表偏酸，偏堿性了就顯示偏紫色。一般來說，細胞吸收營養后，變黃后就暗示我們要換培養基啦!所以密切觀察很重要哦!
2.細胞的居住環境
舒適無菌的環境是細胞健康生活的重要基礎。如下圖為培養細胞的器皿，包括形狀、規格、用途多樣的培養瓶、培養皿及培養板。最終住進37℃，5%CO2的恒溫培養箱。
3.細胞培養皿和培養瓶區別?
就細胞培養狀態來說，培養瓶和培養皿沒有太大區別，主要在于安全系數(培養瓶>培養皿)、培養細胞數量(大培養瓶>培養皿)。但是培養瓶成本也會相對較高，因此無特殊要求，一般選擇培養皿即可。
4.為什么細胞復蘇后，很多難以貼壁?
忽略培養基的問題，主要考慮細胞凍存時狀態差或者復蘇時動作太慢導致細胞死亡。切記最重要的融化速度要快，可不時搖動冷凍管，使之盡快通過最易受損的溫度段(-5～0℃)。
5.細胞凍存時對細胞量有要求嗎?
細胞復蘇時會有一定的細胞死亡，因此細胞的濃度應足夠高，起始濃度106—107個/ml/管。
6.細胞污染怎么辦?
如發現細胞有污染，一般建議丟棄。如果細胞非常寶貴，可試著加入含抗生素的培養基反復清洗，并用抗生素含量高的培養基培養，并經常更換培養基。
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