生化試劑盒
- 超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒
- 恒遠生物生化試劑盒應用領域廣泛，涉及酶類、氧化應激、鐵死亡、肝功能、腎功能、糖酵解、無機鹽離子、脂質代謝、植物抗逆性等。檢測樣本類型豐富，涉及多種體液、組織、細胞、食品、植物、藥物、化妝品等。主要的檢測儀器為酶標儀，分光光度計和熒光酶標儀。我們將以高度的責任感和出色的產品質量為客戶提供高效專業的生化代測服務和實驗技術解決方案。豐富的經驗、優良的品質、充足的庫存、準確的交貨時間、極具競爭力的價格，所有這些保證了我們向您提供的最專業最優質的服務
| 中文名稱 |
超氧化物歧化酶(SOD)試劑盒 |
| 規格 | 96樣 |
| 貨號 |
A-001-SH |
| 價格 | ￥700 |
| 樣本類型 | 血清，血漿，組織勻漿，細胞裂解液、細胞培養上清液等 |
| 檢測范圍 | 詳見說明書 |
| 檢測方法 |
微板法 |
| 貨期 | 3-5天 |
| 說明書 | 咨詢我司業務員獲取 |
| 文獻 | 咨詢我司業務員獲取 |
注 意：正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定
測定意義：
SOD（EC 1.15.1.1）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中，催化超氧化物陰離子發生岐化作用，生成 H2O2 和 O2。SOD 不僅是超氧化物陰離子清除酶，也是 H2O2 主要生成酶，在生物抗氧化系統中具有重要作用。
測定原理：
通過黃嘌呤及黃嘌呤氧化酶反應系統產生超氧陰離子(O2-)，O2-可還原氮藍四唑生成藍色甲臜，后者在 560nm 處有吸收；SOD 可清除 O2-，從而抑制了甲臜的形成；反應液藍色越深，說明 SOD 活性愈低，反之活性越高。
需自備的儀器和用品：
酶標儀、離心機、移液器、96 孔板、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；
試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；
試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；
試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；
試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
粗酶液提取：
1、細菌、細胞或組織樣品的制備：
細菌或培養細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（104 個）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
組織：按照組織質量（g）：提取液體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1mL 提取液），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。
2、血清（漿）樣品：直接檢測。
測定步驟：
1、 酶標儀預熱 30min 以上，調節波長至 560nm。
2、 將試劑二用蒸餾水稀釋兩倍，用多少配多少。（試劑二和蒸餾水 1：1 稀釋）
3、 將一瓶試劑四用 5mL 蒸餾水溶解（溶解后一周內用完），再用蒸餾水稀釋 4 倍，用多少配多少（試劑四和蒸餾水 1：3 稀釋）。
4、 測定前將試劑一、三和四在 37℃（哺乳動物）或 25℃（其他物種）水浴 5min 以上。
5、樣本測定（在 EP 管或 96 孔板中依次加入下列試劑）
|
試劑名稱（μL） |
測定管 |
對照管 |
|
試劑一 |
45 |
45 |
|
試劑二 |
2 |
2 |
|
樣本 |
18 |
|
|
蒸餾水 |
|
18 |
|
試劑三 |
35 |
35 |
|
試劑四 |
100 |
100 |
充分混勻，室溫靜置 30min 后，560nm 處測定各管吸光值 A。
注意事項：
1、試劑二為酶，不可冷凍，使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于 1，建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用（10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水）。
4、SOD 為什么有的樣本測定管大于對照管，對照管數值在什么范圍？
對照管的范圍是 0.4-1。對照管吸光值過低可能是
（1）試劑二或試劑四沒有現配現用；
（2) 沒有按順序加試劑；
（3）反應時間不夠，可以延長反應時間（反應時間 30min 可以延長到 40min）。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。若出現測定管大于對照管，可能是樣本中雜質的影響太大，為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10 倍后再測，通常可以使測定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
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