行業新聞
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質粒轉化實驗操作步驟
將質粒 DNA 導入細菌的過程稱為轉化( Transformation )。此感受態細菌細胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀。質粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復合物黏附于細菌表面,經 42℃ 短時間熱沖擊處理,促進細胞吸收 DNA 復合物。在豐富培養基上生長數小時后,球狀細胞復原并分裂增殖。被轉化的細菌中,外源基因得到表達。在選擇性培養平板上,可選出所需的轉化子(即含有質粒 DNA 的細菌)。
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酶標板整體背景高該如何處理?
近日,有客戶咨詢公司的業務員,ELISA實驗中標板整體背景高有什么好的處理方式嗎?下面就請我司技術專員為您答疑!
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ELISA試劑盒靈敏度低?
近日,有客戶在做完實驗后,反映陽性對照、質控在內的所有板孔顏色均較淡。這是什么原因造成的?我司技術整理后給出如下解析,邀您來看看!
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ELISA實驗之“溫育”
ELISA(酶聯免疫吸附測定)中的溫育是一個至關重要的步驟,它直接影響到抗原與抗體在固相表面的結合效率,進而影響整個實驗的準確性和可靠性。以下是關于ELISA溫育的詳細解釋:
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質粒轉化的操作步驟你知道嗎
將質粒 DNA 導入細菌的過程稱為轉化( Transformation )。此感受態細菌細胞在 CaCl 2 低滲溶液中膨脹為球狀(感受態細菌的制備,見前)。質粒 DNA 與 CaCl 2 形成抗 DNase 羥基 - 磷酸鈣復合物黏附于細菌表面,經 42℃ 短時間熱沖擊處理,促進細胞吸收 DNA 復合物。在豐富培養基上生長數小時后,球狀細胞復原并分裂增殖。被轉化的細菌中,外源基因得到表達。在選擇性培養平板上,可選出所需的轉化子(即含有質粒 DNA 的細菌)。鈣處理的感受態細胞,一般每微克 DNA 能獲得 10 5 ~ 10 6 個轉化子。除化學方法轉化細菌外,還有電穿孔法( Electroporation ),其轉化率可高達 10 9 ~ 10 10 個轉化子 /μg 質粒 DNA 。
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