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ELISA實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備有哪些?
恒遠(yuǎn)生物溫馨提醒廣大科研者：做實(shí)驗(yàn)前都必須做好充足的準(zhǔn)備（試劑準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)儀器準(zhǔn)備、樣本準(zhǔn)備、實(shí)驗(yàn)參與人員指標(biāo)等等）。本周我司技術(shù)人員就ELISA實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)備工作提供詳細(xì)的介紹說(shuō)明。一起來(lái)看看！
為了使最終的ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果就要較高的可靠性，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前必須做好的前期準(zhǔn)備工作包括對(duì)實(shí)驗(yàn)所需的儀器進(jìn)行質(zhì)控。使儀器保持好的工作狀態(tài)，應(yīng)建立維護(hù)和校正儀器的標(biāo)準(zhǔn)操作程序，常見(jiàn)的需要控制的儀器包括：移液器（加樣槍?zhuān)叵洹⑾窗鍣C(jī)和酶標(biāo)儀。具體質(zhì)控操作請(qǐng)參考如下要求：
移液器： ELISA加樣量小（20-200μl），其準(zhǔn)確性直接影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果，利用稱(chēng)重法檢查：低、中、高三個(gè)刻度分別吸取指示量的水，萬(wàn)分之一天平稱(chēng)重后計(jì)算吸量是否準(zhǔn)確，一般應(yīng)在±5%以?xún)?nèi)。
恒溫箱： 經(jīng)常檢查恒溫箱溫度計(jì)所示的溫度和水中（或溫箱內(nèi)）實(shí)測(cè)溫度是否一致，允許有±1℃的誤差。
洗板機(jī)： 每個(gè)廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定，一般不超過(guò)2μl；人工扣板時(shí)，墊紙不濕；定期檢查管孔是否堵塞。
酶標(biāo)儀：經(jīng)常維護(hù)其光學(xué)部分，防止濾光片霉變，定期檢測(cè)校正，使其保持良好的工作性能。
ELISA實(shí)驗(yàn)有檢測(cè)人的，也有檢測(cè)各種動(dòng)物、植物的某個(gè)指標(biāo)，甚至老師在設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)課題時(shí)會(huì)要求同時(shí)檢測(cè)多個(gè)指標(biāo)。那么需要的樣本量取決于你的檢測(cè)項(xiàng)目,有些檢測(cè)項(xiàng)目需要血清做1:100稀釋, 甚至是更高的稀釋度,那么幾微升血樣就夠了,有些項(xiàng)目只能做較低的稀釋?zhuān)踔敛幌♂專(zhuān)@樣的話每孔會(huì)需要100 ul 左右。zui少的盒子需要10ul，有的需要50，多的需要100。
大多數(shù)試劑盒的細(xì)胞因子檢測(cè)是要稀釋的，稀釋的倍數(shù)各有不同。你的檢測(cè)指標(biāo)要用多少，如果你能要到試劑盒的說(shuō)明書(shū)，就能確定；如果不能確定用什么試劑盒，建議你每個(gè)指標(biāo)留100ul的血清（血漿、組織勻漿、腦脊液、尿液等其他相關(guān)液體樣本）應(yīng)該可以的，采集樣本時(shí)如果樣本充裕，建議您可以用兩支試管分裝樣本，以便實(shí)驗(yàn)完成后需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)問(wèn)題分析。關(guān)于抗凝血和得到的血清血漿體積的關(guān)系,大致上比例是1毫升全血可以得到500 ul 血清或血漿。
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